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精子活體染色三種方法(伊紅法、伊紅-苯胺黑法、低滲膨脹法),哪種方法更經(jīng)典?三種精子活體染色方法均為WHO推薦。
1)伊紅法:粉紅色背景觀察白色精子(活精子)與紅色精子(死精子),結(jié)果立 即觀察,久置可致增加死亡 精子的比率。
2)伊紅-苯胺黑法:黑色背景觀察白色精子(活精子)與紅色或暗粉紅色精子(死精子),結(jié)果無(wú)需立即觀 察,染色片久置后結(jié)果也不會(huì)發(fā)生變化。
3)低滲膨脹法:觀察精子尾部膨脹的為活精子,結(jié)果觀察2小時(shí)內(nèi)完成。久置可致增加死亡精子的比率。 實(shí)驗(yàn)室可根據(jù)自己需要選擇合適的染色方法
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進(jìn)行精子DNA碎片(SCD法)檢測(cè)結(jié)果觀察時(shí),為什么精子頭部的光暈普遍都不大?1)標(biāo)本原因(標(biāo)本本身雙鏈DNA含量不高,或者是參與檢測(cè)的精子濃度過(guò)大);
2)在使用保存液時(shí)沒有充分混勻?qū)е戮覦NA被凍傷;
3)易熔凝膠熔解不充分、37℃平衡時(shí)間不足;
4)在配制3種濃度乙醇時(shí),比例不正確,或操作時(shí)沒按濃度由低到高步驟進(jìn)行;
5)最后染色時(shí)(瑞氏染色)染液質(zhì)量有問題、染色不充分(包括染液量太少、染色時(shí)間過(guò)短、 染色溫度過(guò)低等)。
以上幾種情況均可能導(dǎo)致精子頭部光暈不大,因此在本實(shí)驗(yàn)當(dāng)中要嚴(yán)格按試劑盒說(shuō)明書要求進(jìn)行。
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在使用博銳德公司的精子膜表面抗體IgG檢測(cè)試劑盒時(shí),為什么有的客戶感覺試劑量不足40測(cè)答:博銳德公司生產(chǎn)的精子膜表面抗體IgG檢測(cè)試劑盒,IgG包被乳膠顆粒、抗人IgG抗血清生產(chǎn)裝量均為300ul,理論可60測(cè)試。但在實(shí)際操作過(guò)程中,由于是微量加樣,每個(gè)環(huán)節(jié)操作誤差均可影響試劑盒的測(cè)試量。因此在操作過(guò)程中注意如下:
1)IgG包被乳膠顆粒臨用前盡量不要上下顛倒混勻;
2)取樣用量程為0.5-10ul微量吸咀,先吸取蓋子內(nèi)壁上粘附的試劑,取試劑時(shí)吸咀輕觸液體表面吸樣,不要插入太深,取完樣后,吸咀尖在試劑瓶口輕刮去吸咀外壁的液體;
3)每次取完樣后,立即擰緊瓶蓋,防止揮發(fā);
4)試劑用完后豎直存放冰箱。
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試管嬰兒及人工授精的治療費(fèi)用、所需時(shí)間、成功率做試管嬰兒的費(fèi)用一般包括三部分。一部分是檢查費(fèi)用約5000元;第二部分是促排卵藥物的費(fèi)用,根據(jù)個(gè)人情況和進(jìn) 口國(guó)產(chǎn)藥物不同,費(fèi)用不同;第三部分是手術(shù)費(fèi)用,約20000元??偟膩?lái)說(shuō),做一次試管嬰兒需要3萬(wàn)元左右。人工授精的費(fèi)用分為兩部分,一部分是檢查費(fèi),約2900元;第二部分手術(shù)費(fèi),1340元,根據(jù)個(gè)人情況和藥物,總的來(lái)說(shuō),需要6000-7000元左右。
一般情況下,做試管嬰兒前期男女雙方的化驗(yàn)檢查需要一個(gè)月的時(shí)間,后期用藥及卵泡監(jiān)測(cè)需要1個(gè)半月的時(shí)間,手術(shù)到檢查懷孕時(shí)需要20天左右,整個(gè)過(guò)程大約是3個(gè)月的時(shí)間。最短2個(gè)月的時(shí)間就能完成。
試管嬰兒的成功率是大家十分關(guān)心的問題。決定“試管嬰兒”的成功率高低的因素很多也很復(fù)雜,目前國(guó)際上試管嬰兒的成功率在30%左右。國(guó)內(nèi)目前開展該技術(shù)經(jīng)驗(yàn)豐富的醫(yī)療機(jī)構(gòu),成功率在40%左右。一般情況下,對(duì)正常育齡夫婦每月的自然妊娠幾率在20%左右,人工授精的成功率和自然妊娠的成功率差不多,在15%-20%左右。【展開更多】 -
三代試管嬰兒介紹外受精-胚胎移植(IVF-ET 試管嬰兒)
1978年,世界上第一例體外受精-胚胎移植嬰兒Louise Brown在英國(guó)誕生,這項(xiàng)新的 助孕技術(shù)已經(jīng)幫助成千上萬(wàn)對(duì)不育夫婦生出了健康的孩子。
體外受精---胚胎移植(IVF-ET)就是應(yīng)用藥物促使多個(gè)卵泡成熟,當(dāng)卵泡成熟后,在陰道超聲引導(dǎo)下取卵,卵子取出后,丈夫取精,在實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行體外受精,成熟的卵子和精子在體外受精形成受精卵,繼續(xù)發(fā)育成胚胎,選擇優(yōu)秀胚胎移植到子宮內(nèi)發(fā)育成胎兒。
卵細(xì)胞漿內(nèi)單精子注射(ICSI 第二代試管嬰兒)
卵細(xì)胞漿內(nèi)單精子注射(ICSI),患者應(yīng)用超促排卵藥物,促進(jìn)卵泡發(fā)育,當(dāng)卵泡成熟后,在陰道超聲引導(dǎo)下取卵,部分無(wú)精癥患者可在實(shí)驗(yàn)室應(yīng)用顯微外 科抽吸附睪精子或睪丸活檢取得精子,在實(shí)驗(yàn)室顯微鏡下進(jìn)行卵細(xì)胞漿內(nèi)單精子注射受精,培養(yǎng)胚胎,選擇優(yōu)秀胚胎進(jìn)行胚胎移植。
胚胎植入前遺傳學(xué)診斷(PGD 第三代試管嬰兒)
是指在胚胎移植到子宮前對(duì)胚胎進(jìn)行遺傳學(xué)檢查,然后將正常的胚胎植入子宮,其意義在于優(yōu)生優(yōu)育。主要適應(yīng)證是夫婦攜帶有病變基因,或家庭有遺傳病史者。用于檢查的胚胎可以來(lái)自于體外受精-胚胎移植技術(shù),也可來(lái)自于卵胞漿內(nèi)單精子注射技術(shù)。
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